常見天然類黃酮色素的分離純化及應用實例?
類黃酮色素的應用開發現狀
許多的天然類黃酮色素都是對人體有益的天然活性成分,具有抗氧化、預防心血管疾病、防癌、抗炎等多種生理功效,特別在醫藥方面,有良好的應用和開發前景。
色素類黃酮化合物廣泛分布于植物界,幾乎絕大多數植物都能合成黃酮類。近年來,人們對類黃酮化合物的抗氧化功能和機理進行了比較深入的研究,證實該類化合物是一種很強的活性氧自由基清除劑。迄今已發現了 2000 多種黃酮類化合物,它們多數以甙的形式存在,少數以游離形式存在。黃酮類化合物泛指具有 C6-C3-C6 基本骨架的化合物,包括黃酮、黃酮醇、異共同酮、查爾酮及它們的二氫衍生物和黃烷醇等。主要有本犀草素、蘆丁、橘皮色素、紅花黃色素、原花青素等。
類黃酮色素的分離純化方法
天然黃酮類色素多有酚羥基取代,因此是極性較強的化合物。按照相似相溶原理,可溶于極性化合物,所以對天然黃酮類色素的提取一般用甲醇、乙醇、丙酮水溶液等極性溶劑。
對于花色素類用酸性極性溶劑提取,以保持它的穩定性。?
柱層析是分離純化天然黃酮類化合物的一種主要工具。以前的研究中通常用聚酞胺、硅膠、氧化鋁等做填充料,由于這些材料吸附量大,前處理煩瑣,回收率低等缺點,現極少應用。對于酚類化合物的分離純化現階段普遍使用的填充料是交聯葡聚糖凝膠。
LH‐20(SePhadexLH‐20)分離黃酮類色素特性如下:?
交聯葡聚糖凝膠是一種高度交聯的葡聚糖,在它上面可以根據分子篩效應將物質,以分子大小遞減的次序洗脫得以分離。其中羥基丙醇葡聚糖凝膠(即 SePhadexLH‐20)是通過葡聚糖與甘油聚合,在分離花色素、黃酮類化合物得到了成功的應用。?
Sephadex LH‐20 是羥基丙醇葡聚糖凝膠,適用于純化一些植物次生代謝產物,不但具有分子篩效應,還可以在極性與非極性溶劑組成的系統中起反相層析的作用,所以,它結合了凝膠、分配色譜、吸附層析于一身,能分離結構相近的分子。Sephadex LH‐20 有較強的吸附能力和分辨能力,以水一乙醇為流動相進行梯度洗脫,反復分離,可以對花色素、多聚體花色素進行比較單一的分離。?
? ? ? ? 用 Sephadex ?LH‐20 分離黃酮類化合物的機理是:分離黃酮苷元時,主要是吸附起作用,分離次序取決于游離酚羥基的數目;分離黃酮苷時,分子篩起作用,相對分子質量的大小或含糖的多少決定化合物被分離的次序。黃酮昔元游離酚羥基越多,越難以洗脫,相對分子量越大,苷元上連接的糖越多,越容易洗脫。?
在前處理上,SePhadexLH‐20 可以用有機溶劑溶脹而不影響它的溶脹度,在分離樣品時改變洗脫的極性。當分離結束后,再用大量水一丙酮(l:l)沖洗,可以吸附再生后重復使用,分離效果保持十幾年不變。 ??
北京慧德易科技有限責任公司是 GE ?HealthCare ?Sephadex ?LH‐20 填料的中國區的獨家代理,因此具有較為突出的性價比,同時提供相應成熟的技術服務。?