? ? ? 糖類物質的分析和制備,在液相色譜領域占有重要的地位。迄今為止,大多數的分離介質僅僅局限在分析級別。但是富士硅膠研發出用于制備色譜的新的氨基硅膠。當使用高水相為流動相時,一般的氨基填料會暴露出很多問題。氨基硅膠的pH值很高,一般pH為9.0,在這樣高的pH條件下,目標化合物一般都會變性,并且會毀壞硅膠基質的表面。考慮到這些問題,富士公司研發出新的氨基硅膠填料,稱之為NH SG硅膠。NH SG硅膠可以最小化甚至是避免上述問題,并且對糖類化合物進行更好的分離。
物理特性???????????????????? ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????
NH SG硅膠有3種級別的填料用于制備應用:
-- NH SMB 100-20/45SG???? 用于保護柱,HPLC色譜柱
-- NH MB 100-40/75SG????? 用于Flash柱,保護柱
-- NH MB 100-75/200SG???? 用于開放柱
下表列出了富士NH SG硅膠的一些物理特性。這些填料是鍵合在氨基硅膠上,并且pH中性。
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? | NH ?SMB 100-20/45SG | NH ?MB 100-40/75SG | NH ?MB 100-75/200SG |
硅膠基質 | ? | ? | ? |
比表面積 m2/g | 300 | 300 | 300 |
孔容? ?ml/g | 0.80 | 0.75 | 0.75 |
粒徑 μm | 30 | 60 | 110 |
NH ?SG | ? | ? | ? |
堆積密度 g/ml | 0.63 | 0.63 | 0.63 |
pH | 7.5 | 7.5 | 7.5 |
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中性化合物的分離
對于中性化合物,NH SG硅膠和富士的NH硅膠有著相似的分離色譜行為。
糖類物質的分離
眾所周知,NH官能團會和酮或者羧基發生反應。但是,NH SG硅膠填料可以在有機相/水的流動相體積下分離大多數的糖類化合物,而不發生上述化學反應。NH SG硅膠在正相條件下使用,尤其是親水相互作用模式(HILIC)。作為典型的HILIC模式,在增加水相比例的條件下,洗脫增強。以下的分離應用數據,使用的就是乙腈/水體系。
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TLC和HPLC的預實驗
在使用NH MB 100-75/200SG填料之前最好做一下預實驗。以下是使用NH 薄層板和NH2 SPS 100-5SG做的預實驗。
溶劑條件
糖類的分離通常用到的是乙腈/水做流動相。當乙腈的含量增加,保留因子k’增加。但是乙腈的含量需要仔細的控制,因為隨著乙腈含量的增加,樣品的溶解性會變差。
2-1 寡糖的制備
3. 環糊精的分離
3-1 環糊精的制備
3-2 Fraction A的分析
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